CCR5, рецептор, связанный с G-белком (GPCR), используется большинством штаммов ВИЧ в качестве корецептора. В этом исследовании ученые пытались найти другие GPCR, способные модифицировать инфекцию ВИЧ-1. Работа опубликована в журнале AIDS.
Было проанализировано влияние одного GPCR, коэкспрессируемого с CCR5, EBI2, на репликативный цикл ВИЧ-1. Ученые идентифицировали GPCR, экспрессируемый в первичных клетках CD4 + CCR5 + T, с помощью мульти-RT-qPCR. Димеризацию GPCR изучали с помощью технологии FRET. Клеточные линии, экспрессирующие EBI2, были созданы путем трансдукции с помощью векторов ВИЧ. Проникновение ВИЧ-1 количественно определялось с помощью вирионов, содержащих β-лактамазу, слитую с вирусным белком vpr, ранней и поздней транскрипцией ВИЧ-1 с помощью qPCR, ядерной активацией NFkB с помощью иммунофлуоресценции и трансфекции, а также вирусной продукцией путем измерения концентрации p24 в супернатанте культуры с помощью ELISA.
EBI2 естественным образом экспрессируется в первичных клетках CD4 + CCR5 + T, и что CCR5 и EBI2 гетеродимеризуются. Эта коэкспрессия снижала проникновение вируса на 50%. Количество обратных транскриптов ВИЧ было схожим в клетках, экспрессирующих или не экспрессирующих EBI2. Присутствие EBI2 вызывало транслокацию NFkB и активировало экспрессию генома ВИЧ-1. В глобальном масштабе результатом стало резкое перепроизводство ВИЧ-1 R5, но не X4, в клетках, трансдуцированных EBI2 .
Экспрессия EBI2 в клетках CD4 + CCR5 + усиливает продуктивную инфекцию ВИЧ-1 R5. Поскольку естественный лиганд для EBI2 присутствует в крови и лимфоидных тканях, постоянная активация EBI2 может усиливать репликацию ВИЧ в клетках CD4 + T. Может быть интересно проверить влияние антагонистов EBI2 на остаточную вирусную продукцию, сохраняющуюся у пациентов с авиремией во время лечения.
